gaoshengkeji@163.com
前處理是一個(gè)非常耗時(shí)、繁瑣且容易引入分析測(cè)定誤差的過(guò)程。但是隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,分析技術(shù)和分析儀器不斷發(fā)展,對(duì)分析的靈敏度、精密度和自動(dòng)化程度要求越來(lái)越高,而耗時(shí)、費(fèi)力和效率低的樣品前處理已經(jīng)成為整個(gè)分析過(guò)程的瓶頸,引起國(guó)內(nèi)外分析學(xué)者的廣泛重視,發(fā)展快速、高效、簡(jiǎn)單、綠色的樣品前處理技術(shù)成為分析化學(xué)的前沿課題。迄今為止,不僅傳統(tǒng)的樣品前處理技術(shù)與裝置得到改進(jìn)和完善,而且出現(xiàn)了很多新的樣品前處理技術(shù)與裝置。
樣品的制備和對(duì)樣品中待測(cè)組分進(jìn)行提取、凈化和濃縮的過(guò)程。在整個(gè)食品安全性的檢測(cè)分析中,70%~80%甚至更多的時(shí)間用在樣品的前處理上,而給實(shí)驗(yàn)帶來(lái)的誤差有60%以上來(lái)自樣品的前處理。
樣品前處理的目的就是濃縮被測(cè)物質(zhì)、消除基質(zhì)干擾、保護(hù)儀器、提高方法的準(zhǔn)確性、精密度、選擇性和靈敏度。
1、超聲萃取;
2、微波萃取;
3、固-液萃取;
4、加速溶劑萃取;
5、超臨界萃取;
6、固相萃取;
7、固相微萃取;
8、基質(zhì)分散固相萃取;
9、液-液萃取;
10、微量化學(xué)法技術(shù);
11、液-液萃取;
12、柱層析
1、食品危害殘留物質(zhì)分析特點(diǎn):基體復(fù)雜;目標(biāo)化合物檢測(cè)限量越來(lái)越嚴(yán)格;某些危害殘留物質(zhì)在食品樣品中存在的濃度極低;各目標(biāo)化合物的性質(zhì)差異較大;可能同時(shí)存在多種組分。
2、評(píng)價(jià)前處理方法是否合理,應(yīng)考慮的因素:操作是否簡(jiǎn)便、省時(shí);被測(cè)組分的回收率是否高;成本是否低廉;對(duì)人體及環(huán)境是否產(chǎn)生影響。
用有機(jī)溶劑等方法把被測(cè)物從試樣中提取出來(lái),凈化后供測(cè)定使用。 萃取技術(shù)要求溶劑盡可能選擇性溶解殘留危害物質(zhì),而不是不溶解和少量溶解食品基體,萃取效果的關(guān)鍵是溶劑的選擇,殘留危害物質(zhì)提取回收率的大小直接決定整個(gè)分析步驟的精確度。
1、液-液萃取;2、固相萃取;3、固相微萃取;4、基質(zhì)分散固相萃取;5、柱層析(凝膠、離子交換、親和、分配、吸附柱層析等)
免疫檢測(cè)技術(shù)是以抗原抗體的特異性、可逆性結(jié)合反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析檢測(cè)技術(shù)。在此基礎(chǔ)上結(jié)合一些生化或物理方法作為信號(hào)顯示或放大系統(tǒng)即可建立免疫測(cè)定法。即抗原可以特異性地與抗體結(jié)合,通過(guò)抗原-抗體的特異性識(shí)別反應(yīng)來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。
抗原是能在機(jī)體中引起特異性免疫應(yīng)答的物質(zhì),抗原進(jìn)入機(jī)體后,可刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體和引起細(xì)胞免疫。在免疫測(cè)定中,抗原是能與抗體結(jié)合的物質(zhì),能在機(jī)體中引起抗體產(chǎn)生的抗原多為分子量大于5000的蛋白。
抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(Ig),與免疫測(cè)定有關(guān)的主要為IgG和IgM。 抗原與抗體間的反應(yīng)是依靠局部的分子間作用力結(jié)合的。主要有四種:氫鍵、范德華力、靜電和疏水相互作用。抗原抗體結(jié)合反應(yīng)具有高度特異性、交叉反應(yīng)和可逆性。抗原抗體結(jié)合的理化特性主要表現(xiàn)為由親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。
一個(gè)成功的免疫學(xué)測(cè)定法必須具備的3個(gè)要素:性能優(yōu)良的抗體、靈敏而專一的標(biāo)記物和高效的分離手段。 現(xiàn)有的免疫測(cè)定方法很多,按照不同的方法分類。經(jīng)典的免疫測(cè)定法不需要標(biāo)記物;標(biāo)記免疫測(cè)定法分為放射性標(biāo)記測(cè)定法和非放射性標(biāo)記測(cè)定法,按反應(yīng)介質(zhì)分為均相和非均相免疫測(cè)定法。經(jīng)典免疫測(cè)定法在食品安全衛(wèi)生分析上較少采用,而靈敏度高的非均相、非放射性標(biāo)記免疫測(cè)定法種類繁多,發(fā)展較快、檢測(cè)靈敏度高,使用范圍廣。